今天鑫小编汇总了一些适用于琼脂糖凝胶 的改良方法，一起来看看吧～

 

 

对于E-Gel®琼脂糖凝胶

电泳时间可以比建议时间更长吗？

 

 

对于单排胶孔凝胶，电泳时间不要超过60分钟，对于双排胶孔凝胶，电泳时间不要超过25分钟。电泳时间过长离子将被耗尽，凝胶将被损坏。对于E-Gel® 48琼脂糖凝胶，电泳时间不要超过30分钟，对于E-Gel® 96琼脂糖凝胶，电泳时间不要超过20分钟。

 

 

一个单一载体在电泳结束后

琼脂糖凝胶上出现多条DNA条带

这是为什么？

 

 

DNA质粒的构象会影响它在凝胶内的迁移。质粒DNA可以是超螺旋的（天然3D构象），有切口环状的（一条链上有切口），或者线性的（两条链都有切口）。

 

你可能在琼脂糖凝胶上看到所有这三种形式。其中超螺旋DNA迁移最快，在凝胶中的位置最靠下；线性DNA条带在凝胶中位于中间位置，而带有切口的DNA通常出现在凝胶最顶部，因为它迁移最慢。

 

 

我不小心将 E-Gel®琼脂糖凝胶

保存在了4°C而不是室温

我还能使用它们吗？

 

 

 

虽然我们建议将它们保存在室温，但这些凝胶仍然可以使用。在电泳前将这些凝胶平衡至室温以获得最佳效果。

 

 

 

我的E-Gel®琼脂糖凝胶

在电泳时出现不均一现象，

条带分辨率低或者有拖尾现象。

怎么才能解决这一问题？

 

 

 

可能的原因有：

• 上样了太多的DNA。我们建议每孔上样20–100 ng DNA；但是，你可以每孔上样最 多500 ng。

• 使用了高盐浓度的样本。样本中离子浓度>50 mM NaCl,100 mM KCl, 10 mM醋酸离子，或100 mM EDTA时，将降低分辨率。

• 样本可能使用了TAE稀释，而不是使用了TE或者水。

• 电泳时间过长。我们建议电泳25-30分钟以获得平直的条带。不要电泳超过60分钟，否则凝胶将被损坏。

• 使用了过高电压或过强电流。如果使用带电源的E-Gel®基座，电泳时应使用60–70 V (恒定电压) or 40–50 mA (恒定电流)。电流不能超过60 mA。

• 在E-Base™仪器上电泳E-Gel® 96琼脂糖凝胶时，确保您使用的是“EG”程序而非“EP”程序，“EP”程序是用于E-PAGE™凝胶的。

• 样本上样不正确或样本上样量太低。

• 凝胶没有在上样后立即电泳（为获得最好结果，请在上样后15分钟内开始电泳）。

 

 

我在进行E-Gel®琼脂糖凝胶电泳时

样本从孔内渗出。

这是什么原因造成的？

 

 

请确保您没有过量上样并且在移除梳子时胶孔没有被损坏。

 

 

我的E-Gel® iBase™/PowerBase™

/E-Base™系统持续发出蜂鸣声

或持续亮红灯。

我做错什么了吗？

 

 

 

请检查 E-Gel®胶盒和铜电极。你可以换一个新的胶盒看看是否接触不良。过冷的胶盒或不恰当的操作条件也可能造成这个问题。胶盒应在室温使用，避免将其保存在4°C。

 

 

我的 E-Gel®琼脂糖凝胶

在成像仪内观察时出现斑块。

我应该怎么办？

 

 

这里是一些建议：

• 用酒精和Kimwipes®纸巾擦拭胶盒。

• 对相机镜头进行清洁。

• 对成像系统的曝光时间和亮度选项进行调整。

 

 

和iBase™电源系统配套使用的

E-Gel® Safe Imager™实时透射仪

不工作了。

我应该怎么办？

 

 

请检查iBase™电源系统的电源线。PowerBase™ v.4系统和E-Gel® Safe Imager™实时透射仪的电源线经常被混淆。

 

如果用错电源线，虽然风扇和LED灯将正常工作，但蓝光灯将不会工作。你需要使用iBase™电源线，它上面写有“48V”。

 

 

 

我在进行E-Gel® EX

琼脂糖凝胶电泳时没有电流

这是为什么？

 

 

这里是胶跑得不正常的一些常见原因：

• 底座的铜电极因为不当使用而损坏。请确保底座的铜电极是完好的。

• 您使用的胶盒已经过期或有瑕疵。

• E-Gel® EX胶盒没有正确的插入底座。

• 您使用了错误的适配器。

 

 

我使用E-Gel® EX琼脂糖凝胶电泳时

分辨率低或者有拖尾现象。

这是为什么？

 

 

这里是一些可能的原因以及解决问题的建议：

• 过量上样。请不要上样超过建议的量。

• 高盐浓度。请稀释样本。

• 对E-Gel® EX琼脂糖凝胶进行了预电泳，这类凝胶是不建议进行预电泳的。

• 上样体积过小或者上样方法不正确。

• 上样时可能引入了气泡。气泡会导致条带弯曲。请根据凝胶种类和上样方法加入推荐体积的样本。为获得合适的条带分离效果，我们建议保持上样量一致。向所有空孔内加入去离子水或TE，并且避免引入气泡。

• 没有在上样后立即进行电泳。请在上样后一分钟内开始电泳。

• E-Gel®琼脂糖凝胶可能过期了。请检查产品效期。

• 电泳时间过长或电流过高。较长的电泳时间会引起电流的上升，导致条带迁移较差或者凝胶融化。对于每种凝胶类型，电泳不要超过建议的时间。